腫瘤浸潤淋巴細胞（TIL）療法

TIL（Tumorinfiltratinglymphocytes）細胞療法，指腫瘤浸潤的淋巴細胞，是由免疫界泰斗Steven A. Rosenberg及其團隊開創的，Rosenberg是世界著名的癌癥學和免疫學專家，也是美國國立癌癥研究院（NCI）的外科主任。他在1988年首次證明使用自體TIL的過繼性T細胞療法可以介導轉移性惡性黑色素瘤患者的腫瘤消退。

Steven A. Rosenberg

在癌癥的早期階段，免疫系統試圖通過動員淋巴細胞的特殊免疫細胞來攻擊腫瘤。在手術切除的腫瘤組織中，我們發現大部分是腫瘤細胞，也有少部分淋巴細胞。這些淋巴細胞中有部分是針對腫瘤特異性突變抗原的T細胞，Rosenberg博士認為它們是深入到腫瘤內部打擊能力最強的免疫細胞，但是由于一些原因(比如腫瘤微環境和PD-1)，這部分淋巴細胞的功能受到了抑制，不能在腫瘤組織中有效的殺傷腫瘤細胞。

但是，科學家可以通過一些體外培養方法把這些腫瘤組織中的某類型的淋巴細胞富集起來，再回輸給患者，就能夠發揮抗腫瘤作用，而且聯合PD-1效果會更好。TILs一旦增長到數十億個，就被注入患者體內，在那里他們攻擊癌細胞，而不損傷健康細胞。在TIL輸注之前，患者要接受化療以幫助TIL攻擊腫瘤。

Steven A.Rosenberg獲得2020年美國癌癥研究協會（AACR）和癌癥研究所（CRI）頒發的癌癥免疫學獎。右為諾貝爾醫學獎獲得者JamesAllison教授。

2011年，Steven A.Rosenberg團隊發表在國際頂級期刊《Clinical cancer research》上的對于轉移性黑色素瘤的2期臨床研究顯示，TIL治療黑色素瘤患者的客觀緩解率（ORR）為56％，完全緩解率（CR）高達24％；浸潤腫瘤的免疫細胞數量與患者的生存機會成正比。

2019年，FDA授予腫瘤浸潤淋巴細胞（TIL）治療方法LN-145為突破性療法認定。

Michal Lotem教授

Michal Lotem教授是全球免疫療法和細胞療法領域的前沿科學家，以色列衛生部首席科學家。Lotem教授早年在美國國家癌癥中心工作，師從于世界免疫療法先驅Steven A Rosenberg教授，并共同開展著名的TIL療法的研究工作。Lotem教授在2004年回到以色列，并將TIL療法帶到以色列開展進一步的臨床研究工作。接著，她又研發出了一種新一代的個體化黑色素瘤疫苗。在過去的十幾年里，Lotem教授用她研發的全球首個個體化疫苗免疫療法，治療了無數從世界各地轉診來的晚期黑色素瘤患者。并且研發出改良同種異體疫苗，用于結直腸癌、乳腺癌等其他癌癥患者。

這種療法基于其極高的成功率和安全性，已經被以色列衛生部正式批準用于臨床治療，以色列哈達薩醫院也是目前全球僅有的一家可以執行這種疫苗免疫療法的醫院。

TIL療法的特殊之處

1. 殺傷能力更強

TIL的免疫細胞來自于腫瘤組織，而其他細胞免疫療法大部分來取自血液，這直接決定了免疫細胞識別腫瘤的能力。據估計，腫瘤里分離出的免疫細胞，有60%以上能識別腫瘤，而血液里面分離的免疫細胞，不到0.5%。

2. 根據特定突變，精準識別

這種新型的療法不是像傳統的簡單的擴增回輸，而是要確定患者病例中特定的突變。之后利用突變信息找到能夠最有效瞄準這些突變的T細胞，最后提取出專門患者腫瘤中細胞突變的T細胞，這些細胞具有精準識別癌細胞的能力。

Rosenberg對常見胃腸道癌的患者的研究證明了不同患者之間免疫應答的獨特性。通過對75位患者的生物學樣本進行全外顯子測序，確定了124個新抗原的TIL。他們發現，99%的新抗原決定簇在每個癌癥患者中都是完全不同的。因此，必須從每個癌癥患者中取出細胞，確定哪些細胞可以真正識別和攻擊癌癥，將這些細胞進行培養，擴增才能起到治療效果。

3. 擴增量大

TILs細胞經過分離篩選后，會加入白細胞介素2進行培養，增加免疫細胞存活的幾率，最大限度的擴增免疫細胞，達到數百億~數千億級別，確保T細胞的有效性和活性后重新注入到患者體內。而CAR T療法擴增通常不超過1億。

TIL療法治療過程

第一步：取得

通過手術，取得患者的腫瘤組織，其中混雜著腫瘤細胞以及T淋巴細胞；

第二步：分離淋巴細胞

腫瘤組織樣本被運送到專有的GMP設施，在那里TIL被分離并繁殖，將不同種類的T淋巴細胞在細胞板上克隆化，并加入高濃度的IL-2來選擇培養，在3周內產生數十億TIL；在IL-2的刺激下不同種類的T淋巴細胞都得到了克隆擴增，形成了細胞群；

第三步：鑒定分離

用患者的腫瘤細胞和擴增后的T淋巴細胞反應，凡是能夠發生殺瘤效應的T淋巴細胞群作為陽性TIL群留下，其余的丟棄；

第五步：擴增TIL

用負載了腫瘤特異性抗原的樹突狀細胞（DC）進一步擴增培養腫瘤特異性的TIL；

第六步：輸入體內

患者開始1周的預處理治療（清髓）以準備接受TIL。在TIL輸注后立即接受多達6劑IL-2，來支持患者體內TIL的生長和激活。從腫瘤提取到TIL輸注的時間是6-8周。

實體瘤療效數據

1 結直腸癌

在2016年發表的文獻中，Rosenberg和其他研究人員合作，使用這種方法成功治療轉移性結直腸癌患者。

KRAS G12D突變的結直腸癌患者經過TIL治療后，患者肺部的7個轉移灶中6個病灶消失殆盡，其中三個完全消失，患者在4年后仍然沒有疾病進展。

2 宮頸癌

TIL治療晚期宮頸癌患者，客觀緩解率（ORR）44%，完全緩解率（CR）11%，疾病控制率（DCR）高達85%。

3 肺癌

一項由美國Moffitt癌癥中心開展的基于TIL細胞治療的Ⅰ期臨床結果顯示：在12名可評估的非小細胞肺癌患者中，TIL療法可達到25%的總緩解率，其中2名患者達到持久的完全緩解。這些患者都是已經接受過PD-1（Opdivo）治療后病情進展的晚期患者。

4 乳腺癌

2018年，《NatureMedicine》上發表的一份報告描述了在用對4種突變蛋白（SLC3A2，KIAA0368，CADPS2和CTSB）的TILs治療的患者中成功治療化學難治性激素陽性轉移性乳腺癌。反應已經持續進行了22個月以上，并且患者在4年后仍然沒有疾病。

5 黑色素瘤

C-144-01是一項2期臨床試驗，招募已被診斷患有IIIc期或IV期轉移性黑色素瘤的患者。患者之前接受至少一次全身治療，其中還有66名接受過PD-1抑制劑治療的患者，CTLA-4抑制劑的 80人，BRAF / MEK抑制劑組合的23人。結果顯示：疾病控制率（DCR）高達80％；

客觀緩解率達到38%，包括2例（3％）完全緩解，23例部分緩解（35％）和28例（42％）病情穩定；中位隨訪時間為8.8個月，未達到中位反應持續時間。

同時，患有PD-L1陰性的患者也有響應，這說明對免疫檢查點抑制劑無效的患者仍能獲益于TIL療法。

以色列哈達薩醫院（HadassahMedical Center），1912年成立，位于耶路撒冷，擁有兩個院區（Ein Kerem院區和Mount Scopus院區），是集醫療、科研、培訓多種功能為一身的世界著名醫療機構，是以色列的國家轉診目標醫院，以治療復雜、棘手的病例而享有盛譽，共有2300名醫護人員，800張床位，是接待外國元首和政府首腦就診的指定醫院。2005年曾因救治巴勒斯坦傷病員、促進以巴和平而獲得諾貝爾和平獎提名；另外，以色列前總理沙龍昏迷期間曾在這里進行為期三年的療養。以色列超過一半的醫學研究是在Hadassah完成的，每個部門結合研究單位還有很多跨學科研究中心。