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如何在腫瘤組織中分離和純化其線粒體?

發布日期:2021-05-19

國外臨床上,針對致瘤性線粒體DNA突變的嚴格評價,有大量文獻證實,線粒體DNA突變促進了人類腦瘤、及其他各種癌癥的發生。另外,線粒體DNA變化,也能改變細胞能量代謝。

為了確定線粒體DNA突變,是否促進腦腫瘤能量代謝缺陷,國外也從致病性突變角度進行了研究。這些腫瘤,包含了大多數惡性腦腫瘤生長行為,其中2種腫瘤如室管膜母細胞瘤(EPEN)和星形細胞瘤(CT-2A),通過將20-甲基膽蔥注入C57BL/6J小鼠腦內,獲得陽性。

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另外3種腫瘤VM-M2、VM-M3和VM-NM1,由VM近交小鼠腦內自發形成,而其自發性腦腫瘤高發的特征,卻獨一無二。

而后,VM-M2和VM-M3腫瘤表達髓系/間充質細胞的多重屬性,顯示出了人類多形性膠質母細胞瘤的侵襲性生長行為。由于VM-NM1生長迅速,但在腦外生長時,并無高度侵襲性和轉移性。

專家組又從5種腦腫瘤中,制備了克隆細胞系,然后均生長于同源小鼠宿主皮下,這樣做是為了獲得足夠的腫瘤組織,再根據已建立的流程,來分離和純化線粒體。

并且,每種腫瘤的線粒體DNA,都與從相應的正常同源小鼠宿主品系中、純化的腦線粒體DNA進行比較。通過對各個腫瘤全線粒體基因組直接測序,并與相應宿主小鼠品系的正常腦組織進行比較,幾乎未發現,存在基因改變。