安德森癌癥中心 骨髓或外周血樣本監(jiān)測(cè)的方法

臨床通常情況表明，PV、ET和PMF的診斷，包括JAK2-V617F突變的初始評(píng)估，進(jìn)一步分析如果伴有JAK2基因，外顯子突變可能是PV，而伴有MPLW515L/K突變可能是ET或PMF。安德森癌癥中心轉(zhuǎn)診后檢測(cè)指標(biāo)的選擇，應(yīng)根據(jù)初步的篩查結(jié)果而確定。

有幾種方法可用于檢測(cè)JAK2-V617F，包括相對(duì)不敏感和不能定量的限制性片段長(zhǎng)度，多態(tài)性分析或Sanger測(cè)序，以及更靈敏和可定量的焦磷酸測(cè)序（靈敏度1%），或等位基因特異性的RQ-PCR（靈敏度0.001%?0.01%）。DNA和RNA樣本可分別用于確定基因拷貝數(shù)和JAK2突變的轉(zhuǎn)錄本水平，兩者均可采用BM和PB樣本檢測(cè)。安德森癌癥中心轉(zhuǎn)診時(shí)，分選粒細(xì)胞或巨核細(xì)胞可提高檢測(cè)靈敏度，特別是當(dāng)突變水平非常低，而進(jìn)行MRD監(jiān)測(cè)時(shí)。

但是，安德森癌癥中心轉(zhuǎn)診技術(shù)，在臨床上具有挑戰(zhàn)性，RQ-PCR檢測(cè)未分選的骨髓或外周血樣本，是目前使用廣泛的監(jiān)測(cè)JAK2-V617F突變MPN的方法。而且研究表明，異基因造血干細(xì)胞移植后該突變消失，血液學(xué)復(fù)發(fā)PKC412仍有效。KIT基因突變分析有助于肥大細(xì) 前再次出現(xiàn)，小部分正常人PCR也可檢測(cè)到，非常胞增多癥的診斷、理解其分子發(fā)病機(jī)制，指導(dǎo)治療低水平的JAK2-V617F76。

安德森癌癥中心轉(zhuǎn)診機(jī)構(gòu)愛(ài)諾美康介紹到，因此，該結(jié)果解釋需要謹(jǐn)策略選擇及MRD監(jiān)測(cè)，尤其是初診時(shí)。MPL-W5I5L/K突變的檢測(cè)方法，可以檢測(cè)KIT突變，包括等位基因與JAK2-V617F類似。然而，JAK2基因12外顯子由異性PCR、焦磷酸測(cè)序和Sanger測(cè)序。

鑒于其突變的多樣性，雖然近高分辨率熔解曲線，分子肥大細(xì)胞成團(tuán)聚集的特性，和由于骨髓纖維化骨髓穿析，給我們帶來(lái)了一些希望。安德森癌癥中心轉(zhuǎn)診對(duì)Sanger測(cè)序，仍是更好刺取樣較差的情況，推薦采用焦磷酸測(cè)序靈敏度的檢測(cè)方法。