去美國看病 探針越短越有助于檢測基因改變

在比較基因組雜交技術發明之前，染色體核型分析和熒光原位雜交（FISH）技術，常分別用于檢測染色體及局部特異性位點的改變。核型分析是對分裂中期染色體進行吉姆薩染色，通過觀察染色體G顯帶特征，來分析染色體重排。去美國看病后，FISH法是利用局部特異性探針，來識別特定DNA片段的缺失、擴增和易位。

染色體涂染技術和光譜核型分析技術，拓展了FISH方法，從而可同時檢測多條染色體或多個染色體片段。aCGH技術是一種“反向熒光原位雜交”，其探針置于載體上而樣本被標記。同時它也是一種“競爭雜交”。去美國看病服務機構愛諾美康介紹到，在基因芯片發明之前，比較基因組雜交，以平鋪于玻片上的正常細胞分裂中期染色體，作為競爭性雜交的靶點。

第一代全基因組aCGH技術平臺，將DNA克隆片段固定于芯片的微陣列上來，研究基因組中特定的靶序列，例如Pollack及其同事報道了以3360個cDNA制作的CGH芯片。Snijders等應用含有0.1Mb人類DNA片段的細菌人工染色體（BAC）及其他克隆，研究2460個位點的拷貝數變化?；谌祟惢蚪M物理圖譜發展起來的嵌合芯片，可覆蓋整個基因組。

去美國看病服務機構愛諾美康介紹到，小于兆堿基的嵌合芯片（SMRT），首次涵蓋了人類的全基因組，由32433個BAC克隆構成，每個靶點重復點樣3次BAC克隆的重疊式排列，使得檢測標記克隆之間的序列改變的操作不需再做。SMRT芯片技術可檢測>80kh的DNA拷貝數變化，高密度芯片的應用，增加了CGH芯片的分辨率，寡核苷酸探針是一類含有25~80個核苷酸的序列，將aCGH含有1000000個探針。去美國看病為了同時獲得拷貝數，及等位基因的信息，人全基因組Affymetrix SNP6.0芯片目前已實現商品化。

去美國看病后應用的每一種技術平臺，都擁有其特殊的芯片制作技術，而Illumina BeadChip技術將寡核苷酸探針固定在微珠表面，佳寡核苷酸探針的長度，視不同的技術平臺而定。每組探針都由25mer的探針對構成，識別待測樣本是完全匹配還是堿基錯配。

Agilent和Illumina平臺使用50?60mer的寡核苷酸探針，以達到高靈敏度。去美國看病值得注意的是，芯片的分辨率并不是依賴于芯片成分的長度，比如含25mer芯片成分的分辨率并不是25hP，而是依賴于探針的密度和分布，探針越短越有助于檢測到小的基因改變。