出國就醫 樣本中的同位素標記如何關聯

經研究證實，體外定量及標記方法包括同位素親和標記（ICAT）、相對和絕對定量的同重標記（i-TRAQ）和串級物標記（TMT）。這些方法不需要標記活細胞，因此可以用于臨床。出國就醫后發現，在ICAT標記技術中，不同樣本中的半胱氨酸殘基，由“輕”或“重”同位素標記，同時標記生物素。

此后，這些樣本1：1混合，以胰蛋白酶消化。生物素是用于親和純化半胱氨酸衍生的肽段，此后用于質譜分析。出國就醫通過這種方法，樣本的復雜性大大降低，但是，無半胱氨酸的肽段不能得到定量信息，并局限于兩兩樣本的比較。iTRAQ是另外一種體外標記的方法，標記在所有肽段的N末端，多標記8個生物樣本，并進行同時檢測和相對定量。

相似的，TMT方法標記不同質量的第一級胺類，并可以同時鑒定和定fi多達10種蛋白質。非標記定M方法，不需要額外的樣本準備，體內體外均可應用，變得越來越流行，并越來越多地作為基于標記方法的補充。出國就醫使用的這類方法無同位素標記，而是利用肽段前體的信號強度或利用片段譜的數量，來直接比較不同質譜循環數的信號強度，以檢測給定蛋白質的肽段。

絕對定量（AQUA）是一種靶向技術，在準備的樣本中加入已知濃度的同位素標記，合成肽段作為標準。通過比較合成的肽段與內在對應的、肽段之間光譜信號強度、面積或面積比來進行定量。或者，出國就醫的樣本中，所有的肽段與合成肽段比較，以獲取相對蛋白豐度的定量信息。

多重反應監測（MRM）與選擇性反應監測（MSRM），指一種靶向蛋內組質譜技術，二者可相互替代。在此出國就醫過程中，基于m/Z，利用四極質M分析器，對來自復雜樣本基質的特定肽離子進行選擇-片段化-選擇。樣本常規用胰蛋白酶消化，并經nano-LC洗脫分離，進入三重四極質譜儀，在儀器中具有預先確定m/z比值的前體肽段離子，通過第一個四極質量分析器（Q1）。

出國就醫服務機構愛諾美康介紹到，在Q1中選擇的離子轉入第二個四極質量分析器（Q2），在此發生前體離子CID。特定的撞擊能量使進入Q2的每個前體離子獲得足夠的速度，在它們與泵入小室內的氦氣和氬氣撞擊時打斷肽鍵。源自前體片段的離子產物，轉入第三個四極質M分析器（Q3），在此特異的預先確定的產物離子，通過電子倍增器檢測以確定目標。