出國就醫 如何利用熒光強度分析基因表達

國外臨床實驗的流程上，相關微陣列技術是在載玻片或硅芯片上制成的網格，這些網格上固定著代表著數千個基因的DNA探針，能與特定RNA互補形成雜交的DNA序列。出國就醫服務機構愛諾美康了解到，使用微陣列分析樣品時，網格上的探針雜交檢測到相應RNA，就表明該基因正在表達轉錄。

由于典型的情況，通常是數千種基因特異性雜交探針，被固定在了載玻片或硅片上，通過機器人或激光技術，將特定的DNA探針固定在特定的位置。出國就醫服務領域獲悉，從腫瘤等生物樣品中分離得到RNA，并連接上熒光核苷酸或熒光標簽，然后采用微陣列芯片，與標記的RNA或其互補DNA產生孵育。

出國就醫領域發現，針對未雜交上的RNA則被洗脫，然后利用計算機分析微陣列數據，而后以不同顏色如紅色和綠色，來標記兩個樣品與同一個微陣列雜交。出國就醫服務機構了解到，使用電腦掃描儀分析，雜交到探針上的RNA或cDNA的熒光強度，便可定量分析基因表達。

有兩種常見類型的微陣列，即cDNA微陣列和寡核苷酸微陣列，這兩種微陣列的差異在于它們探針的性質。出國就醫服務領域認為，在cDNA微陣列中，每個探針具有各自的雜交溫度，其通常是基于GC含量等因素，因此測試樣品必須與同時處理的對照樣品進行比較，測得相對表達強度。

出國就醫服務機構愛諾美康了解到，在寡核苷酸微陣列中，設計合成探針時可以使所有探針，都具有相同的雜交溫度。于是可以測量一個樣品中基因的絕對表達量，且微陣列的結果可以以不同方式表示，一種是展示熱圖方式，而另一種則用顏色來表示基因的相關表達水平。