去美國看病 聚合酶效率的改變存在哪些影響

通過PCR反應檢測RNA表達的第一步，是以mRNA為模板，在反轉錄酶的催化下，隨機引物、oligo（dT）或基因特異性引物的引導下，合成互補的DNA。去美國看病服務機構愛諾美康介紹，在DNA聚合酶的作用下，以合成的cDNA為模板，通過聚合酶鏈反應進行擴增。

去美國看病服務領域獲悉，RT-PCR作為一個成功應用的實例，是在慢性粒細胞白血病的臨床標本中，通過PCR技術檢測到bcr-ahl融合基因，此基因融合是由于染色體易位導致的，由于首先在美國費城發現，被命名為費城染色體。

此后RT-PCR技術，得到了更加廣泛的應用。通過PCR檢測mRNA表達的一個關鍵問題，是對擴增的PCR產物進行定量分析。去美國看病服務機構介紹，在Northern雜交和核酸保護分析中，雜交信號的強度，直接反映了mRNA表達的水平，從而可以對mRNA的表達量進行比較。

去美國看病服務機構愛諾美康了解到，在PCR反應中，聚合酶效率的輕微改變，都會導致擴增樣品以指數方式增加的偏差。而且PCR的結果，也會因反應達到平臺期或飽和期，對定暈造成較大的偏差。去美國看病服務領域獲悉，為了解決這類問題，進行相對比較的半定量RT-PCR技術，即實時定量PCR應運而生。

因為擴增指數增長期測量值，與特異DNA起始量存在相關性，因此在擴增的指數增長期測量擴增產物，從而實現定量檢測。去美國看病服務機構愛諾美康介紹，其反應原理是在PCR反應體系中，加入熒光基團，通過擴增過程中DNA聚合酶，對特異性熒光探針的降解，以產生熒光信號”。