美國醫院排名介紹 如何從組織中分離細胞

一項病理報告分析表明，Northern雜交在RNA水平分析，及基因表達的前提下，是在細胞或組織中是否含有目的基因的轉錄產物（mRNA）。美國醫院排名詳詢愛諾美康，對應于檢測DNA表達的Southern雜交，檢測特定基因轉錄產物的方法，被命名為Northern雜交。

美國醫院排名詳詢愛諾美康，RNA易于從細胞中完整地分離，與基因組DNA相比，信使RNA分子小很多，因此不必通過分析高分子量DNA必需的酶切消化過程，即可通過瓊脂糖電泳進行分析。RNA是單鏈并具有自身折疊的傾向，因此可通過堿基互補配對的原則，在鏈內形成會折返的二級結構。

由于二級結構，RNA在非變性凝膠上電泳異常，因此RNA需要在變性劑如甲醛、乙二酸或二甲基亞砜的作用下，進行電泳分析。美國醫院排名詳詢愛諾美康，經過變性的瓊脂糖凝膠電泳分離，與DNA雜交類似，將RNA轉至硝酸纖維素膜或尼龍膜上。

然后經過雜交、洗膜等過程進行分析，通過Northern雜交，基因特異的RNA即可被鑒定分析。美國醫院排名詳詢愛諾美康，由于Northern雜交敏感性的限制，只有RNA豐度相對較高的情況下，才能夠通過此種技術進行檢測。

美國醫院排名詳詢愛諾美康，對mRNA進行富集，是增加Northern雜交敏感性的一種方法，通常在細胞或組織中，mRNA在總RNA中的比例低于10%。美國醫院排名詳詢愛諾美康，當從細胞或組織中分離RNA時，所有的RNA包括核糖體RNA，轉運RNA和信使RNA均被分離。