通過病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)來實現(xiàn)過度表達

通常，黑色素瘤原位移植具有轉(zhuǎn)移到肺部的傾向，因此多數(shù)使用轉(zhuǎn)移性黑色素瘤模型，進行治療性實驗的主要目標(biāo)是肺轉(zhuǎn)移。然而，筆者近報道了可自發(fā)性轉(zhuǎn)移到腦的WM239A，人類黑色素瘤細(xì)胞株的變種，這些細(xì)胞株的建立是由，初產(chǎn)生名為113/64L的WM239高轉(zhuǎn)移性變種而來。利用該模型，已證明應(yīng)用長春新堿和CTX的聯(lián)合節(jié)律性化療，可使內(nèi)臟轉(zhuǎn)移小鼠長期存活。

在這些長期存活的小鼠中，有20%被發(fā)現(xiàn)存在腦轉(zhuǎn)移瘤，而從這些腦轉(zhuǎn)移瘤建立了兩個轉(zhuǎn)移細(xì)胞株131/4-5B1和131/4-5B2。這些細(xì)胞株原位移植、隨后切除原發(fā)移植瘤后，可自發(fā)性地轉(zhuǎn)移到腦實質(zhì)，偶爾轉(zhuǎn)移到軟腦膜。

筆者的研究結(jié)果是，首個有關(guān)人類原發(fā)瘤在小鼠體內(nèi)發(fā)生自發(fā)性CNS轉(zhuǎn)移，并且再注射仍可遺傳學(xué)地保持其表型。這個模型可促進靶向黑色素瘤中樞系統(tǒng)轉(zhuǎn)移的治療研究，中樞系統(tǒng)轉(zhuǎn)移是惡性黑色素瘤的常見表現(xiàn)并預(yù)后極差。

黑色素瘤原位移植轉(zhuǎn)移模型的構(gòu)建，細(xì)胞株變種和腦轉(zhuǎn)移131/4-5B1、131/4-5B2細(xì)胞株模型，未經(jīng)選擇的人類WM239A黑色素瘤母系細(xì)胞被植人皮下，原發(fā)腫瘤長到約400mm3大小時被切除。切除后4~6個月時，取出小鼠的肺，并用于細(xì)胞培養(yǎng)，終獲得113/64L細(xì)胞系。細(xì)胞移植后在原發(fā)腫瘤切除6周后可導(dǎo)致肺部高轉(zhuǎn)移負(fù)荷，原位移植131/4-5B1細(xì)胞株導(dǎo)致自發(fā)性腦轉(zhuǎn)移。進展期轉(zhuǎn)移模型經(jīng)CTX，和長春新堿治療長期存活的小鼠中，20%伴有腦轉(zhuǎn)移瘤。

從這些轉(zhuǎn)移瘤中分離出131/4-5B1和131/4-5B2細(xì)胞株。原位移植131/4-5Bl和13l/4-5B2導(dǎo)致腦實質(zhì)自發(fā)性黑色素瘤轉(zhuǎn)移灶的形成。乳腺癌原位模型，是將乳腺癌細(xì)胞植人到雌性小鼠的蹊部乳腺脂肪墊中，原發(fā)腫瘤可以隨時用卡尺監(jiān)測。使用人類MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞株建立的模型為常用，該細(xì)胞系的應(yīng)用具有壓倒性優(yōu)勢。另一廣泛使用的細(xì)胞株是MDA-MB435。

出國看病的條件？詳詢愛諾美康。然而，許多報道顯示這種細(xì)胞系表達黑色素細(xì)胞標(biāo)記，現(xiàn)在被分類為M14黑色素細(xì)胞來源的黑色素瘤細(xì)胞。其他人乳腺癌細(xì)胞系模型可在體內(nèi)生長，可能需要雌激素補充（如BT474）或顯示非常 緩慢增長（如MDA-MB-361）。此外，HER-2陽性的乳腺癌細(xì)胞（為乳腺癌重要亞型）可能在細(xì)胞系表現(xiàn)為相反結(jié)果，即體內(nèi)生長不良（如BT474、MDA-MB-361）。

因此，妨礙體內(nèi)評估HER-2靶向治療轉(zhuǎn)移性疾病的療效。鑒于這一缺陷，筆者的實驗室和其他實驗室，已構(gòu)建MDA-MB-231的HER-2陽性變種，通過病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)實現(xiàn)HER-2的過度表達。