海外醫療 重組可構建抗原DNA表達

海外醫療發現，化療藥物氟尿嘧啶處理后，富集的CT-26腫瘤細胞疫苗及與GM-CSF聯合應用，對腫瘤細胞模型的治療效果，未經氟尿嘧啶處理的CT-26細胞疫苗，以及聯合GM-CSF治療組和未治療組為對照。Kaplan-Meier生存分析表明，與其他治療組相比，FU-CT-26腫瘤細胞疫苗聯合GM-CSF治療，能顯著延長小鼠生存期（P<0.01），試驗重復至少三次。

DC細胞是人體中強大的抗原提呈細胞，DC細胞疫苗主要通過電轉染或病毒轉染，將相應的腫瘤抗原表達在DC細胞表面，使之激活淋巴細胞。海外醫療服務機構愛諾美康介紹到，Provenge疫苗于2010年獲得美國FDA批準用于前列腺癌的治療，它是通過將DC細胞與前列腺癌抗原PAP和GM-CSF融合蛋白，共培養24小時制備而成。Provenge疫苗的成功引發了DC細胞疫苗的研究熱潮，研究人員采用單抗原或多種抗原聯合其他治療方式，探索新型DC細胞疫苗，如靶向細胞周期蛋白、靶向腫瘤干細胞及聯合化療藥物或其他抑制劑等的嘗試。

同時，海外醫療研究人員對DC細胞疫苗的作用機制，也進行了深入探索，發現靶向腫瘤細胞錯義突變的DC細胞疫苗，能有效引起機體對腫瘤細胞AAS，和其他新型抗原（neo-antigen）的免疫應答。抑制GSK3信號通路、去除腫瘤微環境中MDSCs細胞和釋放細胞因子CCL3等均能提高DC細胞疫苗的作用。從而說明，DC細胞疫苗能夠從廣度和強度上，提高腫瘤新型抗原特異性的免疫反應。值得注意的是，DC細胞疫苗的不足之處是制備過程比較繁瑣，要通過白細胞分離法獲得足夠量的DC細胞。

前不久報道了靶向腫瘤干細胞的DC細胞疫苗的研究成果，首先在黑色素瘤D5細胞群和鱗狀細胞癌SCC7細胞群中，分離出占5%~10%的ALDHhigh的CSCs，將這些CSCs細胞裂解并負載DC細胞制備成CSC-DC細胞疫苗，對照疫苗用未分選的ALDH1細胞和SCC7細胞裂解物負載的DC細胞制成。在對小鼠局部放療后再進行疫苗治療發現，與對照組相比，CSC-DC細胞疫苗能有效地抑制腫瘤生長和肺轉移，提示CSC-DC細胞疫苗能誘發較強的免疫反應。

因此，海外醫療靶向腫瘤干細胞的DC細胞疫苗治療，有望用于防止腫瘤的復發，此研究為靶向腫瘤干細胞的腫瘤疫苗研究提供了新的思路。對靶向腫瘤干細胞的腫瘤疫苗來說，不足之處是缺乏對腫瘤干細胞進行分離并擴增培養的有效方法。DNA疫苗是通過向細胞注射經遺傳工程技術制備的DNA，使細胞直接產生抗原而引起免疫保護作用的。

從疫苗的發展來看，第一代疫苗是用整個病原體，以活的、變弱的或死的形式來引起免疫反應，但存在引發疾病的危險。第二代是利用病原體的蛋白抗原。第三代疫苗也就是DNA與RNA疫苗。海外醫療用重組的方法構建抗原DNA表達載體，通過注射或基因槍打入體內，產生分泌型或膜結合型抗原。DNA疫苗的靶向腫瘤抗原免疫原性一般較弱，單獨使用存在療效不佳現象。

隨著基因工程技術的進步，可以在載體抗原序列上加上其他一些輔助因子，而促進序列有效表達，研發了一種新型的DNA腫瘤疫苗，稱為趨化性抗原DNA疫苗。海外醫療通過將腫瘤相關抗原表達序列，與SLC和IgG的片段融合表達，SLC可吸引DC、T和B淋巴細胞，并且DC細胞通過Fc受體可高效捕獲融合抗原，促進抗原提呈的作用。