去美國看病 通過靈敏度可測試突變的基因
發布日期：2018-02-18對于海外分子監測，Sanger測序是常用的DNA測序方法，并且可以準確地檢測DNA序列，高達500?1000個堿基對（bp），但它的靈敏度有限，僅20%。因此，去美國看病在MRD監測方面，應用價值有限。焦磷酸測序可以檢測模板中1%~5%的突變，并且還能評估突變與未突變克隆的比例，然而它只能測序小于50bP的DNA序列，適合用于已知的“熱點”點突變的突變分析。
對于去美國看病患者的基因突變，如FLT3基因的內部串聯重復（TTD）和NPM1基因的4個堿基的插入，可采用PCR擴增后，進行毛細電泳檢測PCR-CE，靈敏度已知單堿基突變的基因，可采用等位基因特異性定量PCR檢測，采用PCR引物或探針識別突變，和未突變的序列，可以檢測模板DNA中低至0.01%?0.001%的突變。
然而，對于每個獨特的點突變，則需要設計兩對引物和（或）探針，對PCR-CE毛細管電泳。NPM1基因位于染色體5q35，編碼一個具有多種細胞功能的核磷蛋白，其主要作用是充當前核糖體蛋白胞核，與胞質之間轉運的分子伴侶。去美國看病過程中，它還與腫瘤抑制基因如P53和ARF相互作用，參與細胞增殖和凋亡。
NPM1突變，是目前公認的AML患者常見的遺傳病變，見于25%~35%的成人，及45%?65%核型正常的A.ML患者。已經報道的NPM1突變類超過50種，其中大部分是NPM1基因外顯子，及4個堿基的插入突變，去美國看病常見的是A型突變；即在NPM1基因956?959密碼子間，出現一個四核苷酸的重復密碼子。NPM1基因突變產生核輸出信號，介導NPM1蛋白從胞核至胞質的異常定位，這種異常細胞質定位，可以通過免疫組織化學分析顯示，在沒有FLT3-ITD的情況下，NPM1突變提示臨床結果較好。
去美國看病服務機構愛諾美康介紹到，NPM1突變在復發時非常穩定。據報道，90%?100%NPM1突變的AML病例，在血液學復發前3~6個月，可檢測到相同類型的NPM1突變。此外，80%NPM1突變的AML病例在血液學復發前，出現分子水平復發。因此，NPM1已成為AML患者，MRD監測佳的分子標志物之一。
