出國看病 特異性引物擴增之前需要驗證

在臨床上，用DNA微陣列分析從組織學檢測上，來區分不同的腫瘤。有著顯著不同分子特征的分子分型，可以解釋腫瘤的生物學差異，這可以解釋它們對治療的不同反應，出國看病后有助于確定病人的長期預后。如B細胞淋巴瘤、甲狀腺癌、白血病、乳腺癌、結直腸癌、膀胱癌、骨肉瘤、肺癌。形態相似的大B細胞淋巴瘤的基因芯片，分析有兩個亞型，它們在基因表達上有不同的分子特征。

出國看病研究發現新基因定位，對腫瘤DNA擴增有反應在基因上。近，Wang等通過源自基因表達數據和分類方法，在基因信號發現了一種預測n期結直腸癌患者預后的方法。抗癌藥物耐藥性被認為是由多種機制產生的，微陣列為研究這些機制和預測藥物的敏感性，細胞途徑提供了一種新的方法。

當面臨原發灶不明的轉移性腫瘤時，DNA微陣列分析也是有幫助的，基于每個實體腫瘤典型的多基因表達譜，出國看病后明確診斷是可能的。雖然原發灶不明的腫瘤，可以通過它們的表達特征得以分類，但它們可能含有與目前已知腫瘤不同的遺傳性狀。這種不同的特點應進一步探究。然而，如Pentherouclakis等指出的，針對原發部位分子分型的治療，并不一定對治療有效和改善預后。盡管基因芯片技術的有巨大潛力，但在臨床病理應用方面還存在一些阻礙。

然而，來自手術切除和活檢標準的石蠟包埋組織，標本在微陣列實驗中并不理想的。出國看病采用甲醛固定可導致RNA降解，石蠟包埋過程中的高溫可致RNA發生水解斷裂。相反，DNA微陣列實驗需要新鮮冰凍標本。DNA芯片需要大M的腫瘤和正常對照組的RNA，寡核背酸陣列需要至少5?15噸的RNA組織，cDNA陣列需要高達100|xg的RNA。

因此，從細針活檢和LCM樣本得到的RNA都需要擴增。在出國看病過程中，使用外顯子近端和遠端的特異性引物擴增之前或之后，都需要額外的驗證步驟。例如，無處不在的延伸因子。這就使得程序十分繁瑣和耗費勞力。作為基礎研究，在臨床設置一些基因，可能是在翻譯水平而不是轉錄水平調控，這將妨礙出國看病過程中，DNA微陣列對它們的檢測。

此外，是蛋白質而不是DNA執行細胞功能，我們已經知道mRNA的水平與其蛋白質產物的水平，不存在很好的相關性。出國看病后直接測量組織中蛋A質的水平和活性，將是決定整體細胞功能的好方法。其他的選擇方法包括cDNA微陣列和蛋甶質組學分析，后期的DNA芯 片驗證是關鍵的一步，因為存在患者變異和遺傳異質性。