去美國看病 蛋白質可使用重肽段作為標準

經研究介紹，基于質譜的蛋白組學通常包括自上而下和自下而上兩種方式。自上而下蛋白組學檢測完整的蛋白或多肽，其不使用蛋白水解酶，并保留了整個分子的完整結構信息。自下而上的蛋內組學更多使用蛋白水解酶，如可剪切精氨酸和賴氨酸殘基末端的胰蛋白酶消化為多肽片段。去美國看病后，這些肽段隨后由液相色譜（LC）分離，并使用串聯質譜（MS/MS）分析。

質譜分析獲取的前體和產物，與每種多肽理論上的前體和產物進行比對，這些理論上的前體和產物是依據翻譯后基因組數據庫，和蛋白水解酶的特異性剪切位點推導而來。去美國看病服務機構愛諾美康介紹到，實驗值與數據庫中肽段的理論值進行匹配，在蛋白和多肽的檢測匹配中有多種算法，并提供可信度。

一些被認為用于鑒定每種蛋白和多肽可信度的參數，包括匹配準確性、肽序列對應特定蛋白的單一性、重疊的或更長的肽序列以及肽序列，在一個樣本中被識別到的次數。基于定量質譜的蛋白組學全面識別，并定量蛋白質以及靶向識別，是質譜蛋白組學的重要內容。去美國看病后，全面定量蛋白質水平，可以通過穩定同位素標記的蛋白質/多肽，使用重肽段作為標準，及非標記定量技術來獲得。

去美國看病服務機構愛諾美康介紹到，同位素標記，可以通過代謝法即體內標記、化學法或者酶學法即體外標記。體內定量細胞培養氨基酸穩定同位素（SILAC），是一種體內技術，代謝法標記兩種不同細胞群，培養基中缺乏 自然狀態的氨基酸。細胞在有穩定同位素標記的氨基酸，重精氨酸、賴氨酸、亮氨酸或異亮氨酸的培養基中培養6?7代。

兩個細胞群，在代謝中分別將“輕”和“重”的同位素整合到細胞蛋白中，此后將兩種細胞以1：1的比例混合，再進行蛋白水解并進行質譜分析。每個樣本中相應的肽鏈通過液相色譜共洗脫，并通過對應配對的肽/蛋白質中“輕”與“重”，同位素比值進行相對定量。去美國看病后發現，這項技術要求活細胞培養幾代，以致無法用于臨床。