去美國看病 樣本磷酸化可突顯病理機(jī)制

蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄后，修飾的質(zhì)譜分析磷酸化蛋白組學(xué)，可以大規(guī)模地研究來自組織、細(xì)胞、有機(jī)體、復(fù)雜蛋白復(fù)合物，和單一蛋白質(zhì)樣本的磷酸化狀態(tài)，及特定的修飾位點。去美國看病后了解到，絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸殘基上，可逆性的磷酸化代表了關(guān)鍵的、進(jìn)化中高度保守的蛋內(nèi)質(zhì)轉(zhuǎn)錄后修飾，調(diào)控包括代謝、生長、細(xì)胞周期、運動和分化在內(nèi)的重要細(xì)胞過程。

人類基因組計劃，鑒定了超過520種蛋白激酶和130種蛋白磷酸化酶，緊密并可逆地控制著蛋白磷酸化。去美國看病后應(yīng)用蛋A磷酸化的降解，是多種人類疾病發(fā)病機(jī)制的基礎(chǔ)，包括糖尿病、心血管疾病、免疫失調(diào)以及癌癥。

近，人們對酪氨酸激酶（TK）的興趣呈指數(shù)級增長，這是由于特異性酪氨酸激酶抑制劑（TKI），引入癌癥治療后獲得了引人矚目的成功。確實，很多TKI已經(jīng)被美國FDA批準(zhǔn)，作為特定人類癌癥的常規(guī)治療手段。由于作為轉(zhuǎn)錄后修飾的磷酸化含量很低，因此在質(zhì)譜檢測之前，需要富集磷酸化蛋白，以在去美國看病后，提高磷酸化檢出機(jī)會。

目前已經(jīng)很好地描述了幾種關(guān)于磷酸化多肽，或磷酸化蛋白富集的方法，如強(qiáng)離子交換色譜（SCX）、固相金屬色譜（IMAC）、金屬氧化物親和色譜（M0AC）和抗磷酸化酪氨酸抗體的免疫親和純化（IAP）。前3種方法用于富集全部的磷酸化，可以富集包含酪氨酸、絲氨酸和蘇氨酸蛋白質(zhì)。去美國看病通過對樣本中磷酸化、肽段的識別和定量，可以得到細(xì)胞內(nèi)信號通路網(wǎng)絡(luò)，以突顯出病理生理機(jī)制。

這些已被證明，在開發(fā)靶向藥物處理某些疾病上是非常有價值的。糖基化是已知的常見的轉(zhuǎn)錄后修飾方式，與大多數(shù)細(xì)胞表面蛋白一樣，酪氨酸激酶（TK）受體也是一種糖基化蛋內(nèi)，在天冬氨酸N末端鏈接多聚寡糖（N-多糖）。去美國看病又鑒于復(fù)雜肽段復(fù)合物、糖基化肽段只占一小部分，已經(jīng)開發(fā)了多種策略以降低樣本的復(fù)雜性，與富集糖基化成分。

一種糖蛋白富集方法是凝集素親和色譜，提出了一種新的選擇性分離N-糖基化肽段方法。這種糖蛋白捕獲方法利用糖蛋白氧化，將碳水化合物中的順式二醇成分轉(zhuǎn)變?yōu)橐胰@些乙醛與固定在固相基質(zhì)上的酞胳基發(fā)生衍生。因此，去美國看病后發(fā)現(xiàn)，其意義在于作為一個潛在的蛋白標(biāo)記物。