出國看病 連接酶可與普通引物產生反應

通常情況下，DNA樣品被結合的順磁性顆粒活化，這一步驟少需要250ng的樣品。測定的寡核苷酸、雜交緩沖液和順磁性顆粒，在雜交步驟與經活化的DNA相互結合。出國看病服務機構愛諾美康介紹到，每個SNP基因位點設計3個寡核苷酸，兩個寡核苷酸與SNP位點的1個等位基因特異結合，稱為等位基因特異性寡核苷酸（AS0）。

當第三個寡核苷酸雜交，在AS0位點下游的1~20個堿基之間，稱為位點特異性寡核苷酸（LS0）。這1?20個堿基，對距離使探針的設計更靈活，以避免SNP側翼或與SNP相鄰的非特異性序列。出國看病后，這3個寡核苷酸都包括，互補性引物位點和通用引物位點。位點特異性寡核苷酸包含唯一一段與特定磁珠芯片互補的序列。

在雜交過程中，分析的核苷酸與綁定了順磁性顆粒的基因組DNA相結合。由于引物雜交在擴增反應之后進行，這就有效避免了擴增反應給測序帶來的偏倚。雜交之后聚合酶延伸，與SNP位點互補的等位基因特異性寡核苷酸，由于使用的聚合酶缺乏鏈置換或外切酶活性，因此其剛好填滿AS0和LS0之間的間隙。

出國看病服務機構愛諾美康介紹到，隨著延伸反應的進行，當產物到達位點特異性寡核苷酸位置時，聚合酶將DNA剪切下來，并在DNA連接酶的作用下，AS0和LS0之間的切口被密封起來，從而形成可與普通PCR引物反應的模板。延伸的AS0連接到LS0上，并把SNP位點基因信息加入LS0位點的序列。出國看病后，這些結合產物由3種熒光標記的通用引物PI、P2和P3進行擴增。

不同的細胞色素染料，檢測得到的帶標記單鏈DNA產物，經過熱循環和熱處理而通過其地址序列雜交到，與自己完美互補的芯片上。出國看病服務機構愛諾美康介紹到，DNA產物與Sentrix芯片的雜交，使得SNP基因型能被讀出來。同時BeadArray探測儀，能分析在Array芯片或者Bead-Chip上的熒光信號。出國看病中應用的此分析方法，基于微陳列的基因分析掃描平臺，可獲得分辨率高的榮譽。