去美國看病 探針的強度值會導致假陽性
發布日期:2018-03-05研究發現,染色體免疫沉淀(ChIP)能夠檢測轉錄因子結合位點,通過甲醛固定和超聲處理,使DNA和蛋白質進行交聯,并降解掉未結合的DNA片段。感興趣的蛋白被各自的抗體標記,以完成免疫沉淀過程。去美國看病服務機構愛諾美康介紹到,結合于這些蛋白的DNA被釋放,然后使用微陣列(ChIP-Chip)分析。
有多種方法分析ChIP-Chip數據,平鋪陣列的分析模型,通過參照GC含量探針序列和探針拷貝數量,來標準化探針。一些方法使用隱馬爾科夫模型,而另一些則使用基于滑窗的方法,來判定ChIP的富集區。去美國看病后,直接使用每一種探針的強度值,作為潛在的DNA蛋白的相互作用點,可能會導致很高的假陽性。
因而滑窗方法,通常會被建議用來分析ChIP-Chip數據資料,這時固定的窗口沿著基因組移動,然后分析概括落入窗內的所有探針。任何從概括窗口方法得到的峰值,都將被認為是結合位點。類似的,微陣列能夠研究表觀遺傳學的變化,和具體的DNA甲基化。甲基化的DNA片段能通過各種方法得以富集,DNA片段雜交于微陣列以行全面的檢測。
去美國看病獲得數據資料后,探針強度需要標準化。各種方法可以用來標準化甲基化數據,包括RMA(如前所述),其常常用來分析mRNA表達資料MAT和Potter,將信號強度、序列及所有探針的拷貝數量納入標準化模型。相似于ChlP-Chip分析,滑窗方法通過基因組區域,來概括探針水平值。滑窗方法的選擇依賴于信息資源、生物學則不變。
這些可以通過基于芯片或基于NGS的方法,識別為SNP甲基化敏感性限制性酶富集(MSRE),可以靶向甲基化或非甲基化DN。從而通過PCR擴增,分別富集非甲基化或甲基化片段。去美國看病后,RNA微陣列的出現,描述了過去20年所完成的很多實驗研究,相對于以前的技術,例如反轉錄PCR(RT-PCR)、表達序列標簽(EST)分析、基因表達的連續分析。RNA微陣列是更加有效及高通量的全基因組分析,然而RNA微陣列的根本缺陷,在于它只能測定排布于陣列上的探針的豐度。
因此,它無法獲得特異同種型的表達、新轉錄因子的發現、非編碼元件譜系、RNA序列變異的鑒定等相關數據。其中,特異同種 型表達和非編碼元件譜系,能夠通過比較少用的剪接/接合陣列和平鋪序列,相結合的方法獲得。
去美國看病服務機構愛諾美康介紹到,由于存在潛在的交叉情況,其準確性還不是很清楚隨著二代測序技術的出現,RNA測序(RNA-seq)已經克服了這些問題,其可以同時測得DNA的所有轉錄本序列。被測序的RNA分子被命名為“讀取序列”(長度依賴于測序技術,通常30~400bp)。因此,有助于確定所有RNA成分的結構和功能,其超出了已經注釋的基因。