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美國更好的腫瘤醫院 介紹反應產物的鑒定分析

發布日期:2018-10-01

在一些工程蛋白的表達分子生物學中,許多實驗的相關目標是,運用生物學技術合成基因編碼的蛋白質,這個過程稱為工程蛋白表達。美國更好的腫瘤醫院介紹到,當通過DNA重組的方法表達出的蛋白,具有天然蛋白的特性時,表明編碼此蛋白的基因被成功的克隆。

另外當特定的蛋白質,在自然來源中很難獲得時,通過工程蛋白表達尤為重要。美國更好的腫瘤醫院介紹到,針對體外翻譯系統,是一種簡單、快速的體外蛋白表達系統,其蛋白合成是在含有翻譯必需組分,和具有高效蛋白合成效率的細胞中,如兔網織紅細胞和麥胚提取物系統中進行的。

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美國更好的腫瘤醫院介紹到,在反應體系中加入20種氨基酸、合成或純化的RNA,在適當的反應條件下,即可翻譯成蛋白質。美國更好的腫瘤醫院介紹到,如果反應體系中的氨基酸,經過放射性物質標記(如35S),則反應產物可通過聚丙烯酰胺凝膠電泳,和放射自顯影進行鑒定分析。

為檢驗目的蛋白是否被成功翻譯,可選擇蛋白特異性抗體,通過Western雜交的方法來確定。美國更好的腫瘤醫院介紹到,重組蛋白的大規模生產體外翻譯系統,只能滿足小規模分析研究的需要,為了得到大量的蛋白質,必須應用體內蛋白翻譯系統。