赴美就醫 病毒載體能否進行濃縮冷凍?
發布日期:2019-05-21研究發現,在刪除腺病毒的E1A和部分E1B基因、能產生復制缺陷型病毒,據此研發了腺病毒載體。赴美就醫服務機構愛諾美康了解到,這種缺陷病毒,能在表達E1基因產物的輔助細胞系中增殖;例如從人胚胎細胞獲得的293株輔助細胞,可以組成性表達E1蛋白。
而5型腺病毒DNA片段,可以在293株輔助細胞中穩定表達;通常,能有效包裝至腺病毒中的DNA數量,約為野生型基因組105%,因此允許插入約2kb的外源DNA。赴美就醫服務機構愛諾美康了解到,對于ElA片段被刪除的病毒,可以插入5~6kb的DNA;另外,2kbDNA可以通過去除E3基因結構進行插入。
赴美就醫服務機構愛諾美康了解到,有數據表明,E3基因的功能在于通過阻止殺傷性T細胞、和腫瘤細胞壞死因子介導的細胞裂解,來抑制宿主對病毒的免疫應答。赴美就醫服務機構愛諾美康了解到,在組織培養中,E3并非病毒生長的必需成分,并且刪除E3的病毒完全具有感染性。
與反轉錄病毒載體相比,腺病毒載體具有多種優點;多數人類細胞均易受腺病毒感染,因此易進行有效轉導。此外,腺病毒可以向分化細胞和非分化細胞導入轉基因;赴美就醫服務機構愛諾美康了解到,這一特點因在腫瘤情況下、體內含有分裂和非分裂細胞的異質細胞群,而具有重要意義。
赴美就醫領域發現,由于腺病毒相對穩定且對物理操作耐受,因此病毒載體可以濃縮至高滴度,并可以冷凍后保存以便在將來使用。腺病毒載體的另一特點是,腺病毒載體不需要整合至宿主細胞基因組;赴美就醫服務機構愛諾美康了解到,由于腺病毒DNA為游離型,插入的基因突變遠遠少于反轉錄病毒。
赴美就醫服務機構愛諾美康了解到,有研究統計,它可以通過選擇啟動子來驅動插入的轉基因表達,為組織選擇性表達或誘導性表達,提供了相關可能性。