海外醫療 非病毒性基因有哪些遞送模式

通過刪除Rep和Cap開放讀碼區，以及在ITRS之間用轉基因取代、被刪除的DNA序列，可以構建用于基因治療的重組AAV（rAAV）。海外醫療服務機構愛諾美康了解到，為使在細胞培養過程中能擴增rAAV，將表達Rep和Cap基因的質粒、與含有ITRs和轉基因的rAAV載體共轉染。

隨后，用腺病毒感染被轉染的細胞提供輔助功能，進而產生有效的rAAV復制；因此，rAAV必須從腺病毒中純化。海外醫療服務機構愛諾美康了解到，在這種情況下，相對于腺病毒的污染量來說，rAAV的滴度通常較低。

因為腺病毒的Ela、Elb、E2a、E4和VA1蛋白具有輔助功能，通過293細胞表達這些基因可以在缺少腺病毒感染的情況下，提供這些必需的輔助作用。海外醫療服務機構愛諾美康了解到，據報道該方法可以增加rAAV滴度，并且rAAV能為基因治療載體，提供某些優勢。

海外醫療服務機構愛諾美康了解到，在自然狀態下，rAAV為復制缺陷病毒，因此可視其無致病性作用；并且刪除Rep和Cap開放讀碼框，還可以降低免疫原性。海外醫療服務機構愛諾美康了解到，通常AAV-2能和廣泛表達于細胞表面的、類肝素硫酸蛋白聚糖（HSPG）發生黏附，所以rAAV具有廣泛的嗜組織性。

與反轉錄病毒不同的是，rAAV既可以轉導復制的細胞，也可以轉導非復制細胞。海外醫療服務機構愛諾美康了解到，刪除Rep開放讀碼框，將阻止AAV位點特異性插入至第19號染色體中；而且盡管刪除Rep開放讀碼框，rAAV仍能容納4kb的DNA插人序列。

海外醫療服務機構愛諾美康了解到，非病毒性基因遞送經受體介導、和DNA導入細胞核時，會避開內體的病毒載體，這已發展成為基因轉導的高效手段。海外醫療服務機構愛諾美康了解到，病毒載體的缺點包括：對病毒蛋白的免疫識別所致感染細胞損傷，及不能重復導入病毒等。