出國治療 細(xì)胞攝取與基因表達(dá)存在關(guān)聯(lián)
發(fā)布日期:2019-05-07通過非病毒導(dǎo)入系統(tǒng),可以克服某些特定的障礙,而將質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染至細(xì)胞的常用實驗室技術(shù),還包括了磷酸鈣沉淀和電穿孔等。出國治療服務(wù)機(jī)構(gòu)愛諾美康了解到,在磷酸鈣沉淀方法中,結(jié)合于磷酸鈣晶體的質(zhì)粒DNA、通過細(xì)胞吞噬作用進(jìn)入細(xì)胞,隨后輸送至細(xì)胞核中。
出國治療服務(wù)機(jī)構(gòu)愛諾美康了解到,在電穿孔方法中,瞬間高壓電脈沖作用于細(xì)胞,誘導(dǎo)細(xì)胞膜表面瞬間產(chǎn)生小孔、利于外源DNA進(jìn)入,這兩種轉(zhuǎn)染方法均受到培養(yǎng)細(xì)胞的限制。出國治療服務(wù)機(jī)構(gòu)愛諾美康了解到,將基因顯微注射至細(xì)胞核中,是另一種轉(zhuǎn)染方法;該方法可以避免將DNA暴露于內(nèi)體的酸性環(huán)境。
盡管顯微注射方法操作單調(diào)乏味,但在將DNA導(dǎo)人胚胎細(xì)胞或卵母細(xì)胞時、顯微注射非常有用。出國治療服務(wù)機(jī)構(gòu)愛諾美康了解到,直接將DNA注射至骨骼肌或心肌內(nèi),與細(xì)胞攝取以及轉(zhuǎn)基因表達(dá)有關(guān);隨后將DNA注射至裸鼠的實體瘤,也觀察到了相似的結(jié)果。
這種情況下,報告基因可以在注射后穩(wěn)定表達(dá)5?10天;通過基因槍(genegun)直接注射DNA、是指由粒子介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移,這一過程通過物理力轉(zhuǎn)移DNA。出國治療服務(wù)機(jī)構(gòu)愛諾美康了解到,這種方法,通常在DNA表面覆蓋金顆粒。
隨著覆蓋有DNA的顆粒,加速進(jìn)入組織或靶細(xì)胞中,DNA在細(xì)胞核中釋放。出國治療服務(wù)機(jī)構(gòu)愛諾美康了解到,基因槍注射DNA類似于直接DNA注射的方法,其不足之處為較低的轉(zhuǎn)染效率,以及既對腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)染也對正常細(xì)胞轉(zhuǎn)染。
出國治療服務(wù)機(jī)構(gòu)愛諾美康了解到,陽離子脂質(zhì)體可以形成人工細(xì)胞膜,后者和DNA結(jié)合,通過細(xì)胞吞噬作用將DNA轉(zhuǎn)染至細(xì)胞中。出國治療領(lǐng)域發(fā)現(xiàn),陽離子脂質(zhì)體和DNA復(fù)合物,已用于將DNA導(dǎo)入培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞、小鼠的腫瘤移植物,以及人體腫瘤中。